
當前位置:首頁 > 技術(shù)文章
1-15
發(fā)根農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)細胞是基因工程中用于高效轉(zhuǎn)化大質(zhì)粒的“開鎖工具”,通過高壓電脈沖打開細胞膜,讓外源DNA進入。發(fā)根農(nóng)桿菌電擊感受態(tài)細胞的保存方法主要分為短期和長期兩種,核心是通過低溫環(huán)境抑制細胞代謝、維持細胞膜通透性,同時避免細胞凍融損傷。一、短期保存(數(shù)天至1周)適用于制備后1周內(nèi)需要頻繁使用的場景,核心是“4℃短期低溫暫存”,避免反復(fù)凍融導致活性下降。?保存條件與操作溫度?:4℃冰箱(冷藏層,非冷凍層)。容器:使用無菌的1.5mL離心管(已分裝為單次使用量,如50μL...
12-30
雙抗混合液(100X)用于預(yù)防細胞培養(yǎng)的細菌污染,特別是革蘭氏陽性和陰性細菌的污染。產(chǎn)品經(jīng)過濾除菌處理,可以直接添加到細胞培養(yǎng)液內(nèi)。青霉的含量為10kU/ml,含量為10mg/ml.在細胞培養(yǎng)液中推薦的青霉的工作濃度為100U/ml,鏈霉的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可。核心操作要點如下:一、配制與保存?工作濃度?:按1:100比例稀釋(如5ml雙抗母液+495ml培養(yǎng)基),終濃度青霉素100U/ml、鏈霉素0.1mg/ml。?保存條件?:母液需-20...
11-20
澳洲胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的補充成分之一。它富含生長因子、激素、維生素、氨基酸等多種營養(yǎng)成分,能為細胞提供生長和繁殖所需的條件,因此廣泛應(yīng)用于各種細胞類型的培養(yǎng)中。在選擇時,研究人員需要考慮多個因素,確保所選血清能夠滿足特定實驗的需求。以下是選擇合適胎牛血清時應(yīng)關(guān)注的幾個關(guān)鍵因素:1.質(zhì)量認證與來源首先,選擇有質(zhì)量認證的澳洲胎牛血清至關(guān)重要。市場上有許多品牌,但并非所有血清都經(jīng)過嚴格的質(zhì)量控制。在選擇時,確保血清產(chǎn)品有認證證書,這些認證能確保血清在生產(chǎn)和使用過程中符合一定的...
11-7
廣口儲存瓶是一種瓶口直徑較大的容器,主要用于存放固體物品,其設(shè)計便于取用和清洗?。存放原則:?固體優(yōu)先?:廣口瓶專用于固體試劑(如氫氧化鈉、大理石顆粒),液體試劑需用細口瓶以防揮發(fā)?。?避光防潮?:若藥品見光易分解(如硝酸銀、高錳酸鉀),需選用棕色廣口瓶避光保存?。?密封性?:瓶口內(nèi)壁為磨砂設(shè)計,可配磨砂玻璃塞或橡膠塞,防止藥品受潮或揮發(fā)?。判斷廣口儲存瓶是否干凈,主要通過視覺檢查、水膜測試和功能驗證等方法。以下是具體判斷標準和方法:視覺檢查:透光觀察瓶內(nèi)壁,應(yīng)無可見殘留物、...
10-27
DMEM(Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)基)是一種廣泛使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基,可用于支持很多種類的哺乳動物細胞生長。已經(jīng)在DMEM中培養(yǎng)成功的細胞包括原代成纖維細胞、神經(jīng)元、膠質(zhì)細胞、HUVEC、平滑肌細胞,以及HeLa、293、Cos-7和PC-12等細胞系。針對廣泛的細胞培養(yǎng)應(yīng)用,提供了多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。使用培養(yǎng)基選擇工具查找適合的配方。?低糖培養(yǎng)基的適用場景:??細胞類型?:原代腫瘤細胞、貼壁依賴性強的上皮細胞、單克隆抗體融合實驗。?研究領(lǐng)域?:糖代謝機制、糖...
10-24
在現(xiàn)代細胞生物學研究中,gibco細胞培養(yǎng)基作為細胞生長、分化和增殖的重要營養(yǎng)支持,對于實驗的成功至關(guān)重要。在不同細胞系的應(yīng)用中,其適應(yīng)性往往是決定實驗成敗的關(guān)鍵因素之一。細胞培養(yǎng)基的適應(yīng)性,指的是細胞對培養(yǎng)基的接受程度和適應(yīng)能力,良好的適應(yīng)性能夠支持細胞在特定條件下的長期健康生長。因此,在使用時,除了關(guān)注其基本成分和使用方法外,還需要考慮其適應(yīng)性如何影響細胞的生長和實驗結(jié)果。Gibco細胞培養(yǎng)基的適應(yīng)性受到多個因素的影響,主要包括以下幾個方面:1.培養(yǎng)基成分細胞培養(yǎng)基的成分...
9-26
酵母感受態(tài)細胞是通過特殊處理(如化學或物理方法)使酵母細胞暫時具備吸收外源DNA能力的細胞,主要用于基因克隆、蛋白表達及酵母雙雜交等分子生物學實驗?。轉(zhuǎn)化成功的判斷標準:?菌落形態(tài)與數(shù)量?:成功轉(zhuǎn)化的酵母感受態(tài)細胞在選擇性培養(yǎng)基上應(yīng)形成?乳白色、圓形、直徑≥1mm的單菌落??。若菌落過小(?轉(zhuǎn)化效率驗證?:單質(zhì)粒轉(zhuǎn)化效率通常需達到?103~10?cfu/μgDNA??。文庫轉(zhuǎn)化時,需在缺陷平板上獲得?≥10?個轉(zhuǎn)化子?(如10μL重懸液涂布后菌落數(shù)≥10個。轉(zhuǎn)化失敗的常見原因...
聯(lián)系我們
合肥恩派爾貿(mào)易有限公司 公司地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路624號桑夏精英時代廣場507室 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)掃一掃 更多精彩
公眾號
小程序